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      一株分離自綠化廢棄物堆肥枯草芽孢桿菌的常壓室溫等離子誘變及其發酵條件

      作者:admin 發布時間:2019/06/28 瀏覽量:816

      本期為您推薦北京林業大學林學院李素艷研究團隊發表在《微生物學通報》上的一篇文章:一株分離自綠化廢棄物堆肥枯草芽孢桿菌的常壓室溫等離子誘變及其發酵條件。

      文章摘要內容如下:

      隨著城市的建設,園林綠化也得到了快速發展,中國每年有1400萬噸多的綠化廢棄物。目前廣泛采用的綠化廢棄物處理方法是好氧堆肥,但由于綠化廢棄物含有較高的木質素和纖維素,在一定程度上制約著堆肥的發酵周期,可以通過接種微生物菌種提高堆肥效率。

      為了提高堆肥降解有機廢棄物的效率,本實驗室以羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)為底物,從綠化廢棄物堆肥中篩選得到枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis,B.subtilis)BL03,它具有較好的纖維素分解能力,能提高綠化廢棄物堆肥中纖維素降解和腐殖質合成的速度。為進一步提高B.subtilis BL03的纖維素酶生產能力。利用常壓室溫等離子(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)誘變BL03菌,通過CMC-剛果紅固體培養基觀察水解透明圈和液體發酵后檢測酶活力的方法,進行3輪篩選;通過連續多代培養,觀察突變株的遺傳穩定性;通過梯度溫度、pH 培養,研究突變株發酵的最適生長溫度、培養基初始pH;利用正交設計方法,研究適合突變株發酵培養的工業級原料配方。篩選到2株正突變株,酶活力分別提高了69%和72%;連續10代培養穩定,驗證了突變株的遺傳穩定性;其中酶活力最高的突變株 BLA3890最適培養溫度為37 ℃、培養基初始pH為5.0-6.5,并研究得到較經濟的發酵培養基配方。

      誘變獲得高性能的菌種是研究中常用的一種育種方法,常用的方法有物理誘變、化學誘變等,如:空間誘變、紫外線誘變、亞硝基胍誘變等,但這些方法存在費用昂貴或環境保護、職業健康等方面的負面影響。ARTP 誘變技術是近年發展起來的誘變技術,具有操作方便、突變率高、環境友好等特點。本研究采用ARTP 誘變 B.subtilis BL03 后得到的突變株 BLA1973和BLA3890 在綠化廢棄物堆肥或其他纖維素降解行業具有進一步研究和應用的價值。

      文章精彩內容如下:

      圖片1


      2 菌株在 CMC-剛果紅培養基上的透明圈

      圖片2

      1 兩輪復篩獲得的突變株在剛果紅培養基上的透明圈直徑和CMC酶活力

      表格

      6 不同培養基單因素水平試驗(n=3)



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